紫外可見光度計采用的是物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于紫外可見光度計可檢測，各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同。因此，
紫外可見光度計可看出每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
在使用前，
紫外可見光度計要調(diào)零、調(diào)百校準(zhǔn)，參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，紫外可見光度計用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時，基體中雖不含被測物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時必須保證其不影響測試。
紫外可見光度計經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測物質(zhì)，此時必須經(jīng)過純化將其除去，否則將影響測定結(jié)果。紫外可見光度計在色譜分析中，有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠(yuǎn)的色譜峰，計算機在數(shù)據(jù)處理中不會計入它們，不影響測定。
紫外可見光度計參比溶液與測量溶液就相差鐵離子含量，在測量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描。
紫外可見光度計調(diào)整儀器后，然后再測量含鐵離子溶液的比色皿，這樣測量溶液中的鐵離子會形成自己特定的峰值，次峰值與數(shù)據(jù)庫里基準(zhǔn)峰值對比就可以得出溶液所含量了。如果數(shù)據(jù)庫中沒有鐵離子的曲線，你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線，然后進行測量。
